Fluorescencinės mikroskopijos taikymas

Nustatykite fiksuotų ir gyvų biologinių mėginių struktūras.
Fluorescencinė mikroskopijašiandien yra įprasta gyvybės mokslų tyrimų priemonė, nes leidžia naudoti daugiaspalvį dažymą, ženklinti tarpląstelines struktūras ir matuoti ląstelių fiziologines būsenas.
Fluorescencinės mikroskopijos privalumai
Fluorescencinė mikroskopija yra populiariausias dinaminio elgesio, rodomo gyvų ląstelių vaizdavimo, tyrimo metodas.
Tai atsiranda dėl jo gebėjimo atskirti atskirus baltymus, turinčius didelį specifiškumą nefluorescencinėse medžiagose.
Jautrumas yra pakankamai didelis, kad būtų galima aptikti iki 50 molekulių viename kubiniame mikrone.
Įvairios molekulės dabar gali būti nudažytos skirtingomis spalvomis, todėl vienu metu galima sekti kelių tipų molekules.
Šie veiksniai kartu suteikia fluorescencinei mikroskopijai aiškių pranašumų, palyginti su kitais optinio vaizdo gavimo metodais tiek in vitro, tiek in vivo vaizdavimui.
Fluorescencinės mikroskopijos apribojimai
Fluoroforai praranda savo gebėjimą fluorescuoti, kai yra apšviesti procese, vadinamame „fotobalinimu“. Fotobalinimas atsiranda, kai fluorescencinės molekulės kaupia cheminius pažeidimus dėl fluorescencinio proceso metu sužadintų elektronų kaupimosi.
Ląstelės yra jautrios fototoksiniam poveikiui, ypač trumpos bangos šviesai. Be to, fluorescencinės molekulės, veikiamos šviesoje, linkusios gaminti reaktyvias chemines medžiagas, taip sustiprindamos fototoksinį poveikį.
Skirtingai nuo perdavimo ir atspindžio mikroskopijos metodų, fluorescencinė mikroskopija gali stebėti tik tam tikras struktūras, pažymėtas fluorescencija.